ELISA試驗(yàn)中為什么要避免產(chǎn)生氣泡

通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周?chē)瑢?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。

包被時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。

封閉時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽(yáng)性。

加樣時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性。

加二抗時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性（競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性）。

加顯色液時(shí)有氣泡的話--－顯色不*。

加終止液時(shí)有氣泡的話，1。不能*終止反應(yīng) 2。影響酶標(biāo)儀比色，OD值增高

洗滌時(shí)有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能*洗去，做無(wú)用功。

避免方法：

1。加樣時(shí)盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過(guò)快過(guò)猛。

2。封閉時(shí)一定要加滿(mǎn)孔，

3。洗滌時(shí)一定要加滿(mǎn)孔(重要），氣泡會(huì)浮上來(lái)zui終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。