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人淀粉樣前體蛋白elisa試劑盒

更新時(shí)間:2022-08-11

簡(jiǎn)要描述:

上海恒遠(yuǎn)生物經(jīng)營(yíng)的ELISA試劑盒,具有靈敏度高,操作方便,檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn),歡迎您“人淀粉樣前體蛋白"的詳細(xì)信息。

型號(hào):人βAPP試劑盒96人份/48人份點(diǎn)擊量:1299

產(chǎn)品名稱:人淀粉樣前體蛋白      
英文名稱:Human β amyloid precursor protein,βAPP ELISA KIT 
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份  
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)   
經(jīng)營(yíng)種類(lèi):進(jìn)口分裝和原裝   
主要作用:科研   
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保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
運(yùn)輸條件低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。

如需了解人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒價(jià)格是否有折扣、*或是否有調(diào)整,請(qǐng)咨詢我司業(yè)務(wù)人員:
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操作步驟
     方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
  方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:   
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
試劑器材
  1. 試劑
  (1) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
    NaCO3 1.59克 NaHCO3  2.93克  加蒸餾水至1000ml  
    (2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4?12H2O 2.9克 NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
  (3) 稀釋液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5~10%使用。
  (4) 終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
  (5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
  (6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
  (7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
  (8) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
  (9) 正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。
  2. 器材:
  (1) 聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
  (2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
  (3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
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