酶聯(lián)免疫吸附試驗法是以固相載體吸附技術和免疫酶技術相結合建立的一種檢測方法大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒操作簡便，無需特殊設備，并具有高度的敏感性和準確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時間內，于國內外均取得了較快的進展。
ELISA的特點 靈敏度高，檢測能力可達10-6mg/ml水平；應用范圍廣，既能檢測抗原又能檢測抗體，既能定性又能定量；有效期長，酶標抗體于普通冰箱中可保存一年以上，效價不下降，制成的標本，可長久保存，供隨時復查用。
［附］：免疫酶染色法（組化法） 該法的原理與免疫熒光法相似，不同之處在于用酶標記的抗體，稱酶標抗體。酶標抗體與抗原發(fā)生特異性結合，當加入酶的底物時，底物在酶的催化下，發(fā)生組織化學反應，產(chǎn)生有色物質，該物質不需特殊儀器，在光學顯微鏡下即能觀察，目前常用的酶是HRP，底物為DAB，可棕褐色沉淀物，使玻片組織標本上的抗原所在部位呈現(xiàn)顏色。 大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒 ELISA測定時一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。ELISA操作較繁雜，操作不當將引起較大的誤差。在操作中應注意以下5個方面。
1．隨著病情的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標本進行預處理，例如對血清標本作適當稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測中，還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應和酶促反應時間不*，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導致錯誤結果或定量不準。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物，終止抗原抗體反應，除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手工洗板，前者洗滌質量較好，各反應孔洗滌效果均一，批內、批間差異小，手工洗板應注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準確判定結果須使用ELISA測讀儀（酶標儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應孔的吸光度值（A值）。酶標儀具有良好的重復性。
大鼠D-乳酸脫氫酶ELISA試劑盒 實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗D-LDH抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗D-LDH抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-LDH呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。